<address id="rnhrh"><form id="rnhrh"></form></address>

      <form id="rnhrh"></form>

                    <form id="rnhrh"></form>

                    产品中心 > 基因组DNA提纯系列 > Quick血液基因组DNA快速提取试剂盒(N1131-N1132)

                    Quick血液基因组DNA快速提取试剂盒(N1131-N1132)

                    促销: 572.00~1021.00

                    分享

                    运费 ¥0.00
                    N1131(50次) N1132(100次)

                    Quick血液基因组DNA提取试剂盒(硅胶膜离心柱法)

                    产品组分

                     

                    货号

                    N1131

                    50次)

                    N1132

                    100次)

                    消化缓冲液DS

                    15 ml

                    30 ml

                    裂解液QS

                    20 ml

                    40 ml

                    蛋白酶K

                    1 ml

                    2 ml

                    去蛋白液PS

                    30 ml

                    60 ml

                    漂洗液PE

                    15 ml

                    30 ml

                    纯化液TE

                    5 ml

                    10 ml

                    DNA纯化柱

                     50

                     100

                    说明书

                    1

                    1

                     

                    裂解液MS中含变性剂,请不要直接接触皮肤。

                    漂洗液PE初次使用前用无水乙醇按1: 3稀释,即含75%乙醇。

                    产品说明

                    本产品可直接用于全血样本的基因组DNA的快速纯化。与传统的血液基因组DNA纯化试剂盒相比,本产品无需去除血液中的红细胞,可直接裂解全血纯化基因组DNA,从而更加便捷、高效。其纯化原理是利用独特的细胞裂解液直接裂解细胞核释放基因组DNA,由硅胶膜柱可逆吸附体系中的基因组DNA,经蛋白酶消化、漂洗液清洗除去蛋白质、脂质以及多糖等杂质,用纯化液洗脱获得基因组DNA。本产品适用于未凝固全血,以及经各种抗凝剂(EDTA、肝素、柠檬酸)处理过的全血样本。一次可从少于200 μl全血中中提取到5 μg的高纯度基因组DNAOD260/OD280=1.7-1.9),此基因组DNA可直接用于PCR、酶切等后续实验。

                     

                    质量控制

                    纯化的基因组DNA质量通过限制性酶切和单拷贝基因的PCR扩增鉴定。

                     

                    保存条件

                    蛋白酶K室温运输,于-20保存,避免反复冻融。

                    其余试剂置于室温(15-25)干燥条件下保存1年。

                    如果消化缓冲液DSMS中有沉淀,可在55加热溶解,待恢复室温后混匀即可使用。不会影响基因组DNA的纯化效率。

                     

                    注意事项--------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

                    漂洗液PE第一次使用前请按瓶上标签加入3倍体积的无水乙醇,即15 ml漂洗液PE加入45 ml无水乙醇,30 ml漂洗液PE加入90 ml无水乙醇,使用后立即盖紧盖子。

                    消化缓冲液DS和裂解液MS室温保存可能会有沉淀产生,在55℃加热溶解,待恢复至室温后混匀即可使用。不会影响基因组DNA纯化效率。

                    柠檬酸、EDTA和肝素三种抗凝剂均可使用,但肝素对酶促反应有可能起抑制作用。采血时如没有特殊要求,请使用柠檬酸或EDTA处理血样。

                    基因组DNA的得率,会因抗凝剂的种类以及血液保存条件的不同而各异。

                    基因组DNA需长期保存时,建议使用纯化液TE,用无菌的离心管分装后保存于-20℃-80℃。

                    所有离心步骤均为室温下进行。

                    请严格按照操作步骤操作。

                    操作步骤--------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

                    取全血样品,每220 μl加入到一只1.5 ml离心管内。如果不足220 μl可用缓冲液DS补足。

                        对于哺乳动物全血,每200 μl全血中可提取1.5-5 μg的基因组DNA。如从鸟类、两栖类或更低级的动物血液中提取基因组DNA,因其血液中红细胞有细胞核,血液用量勿超过20 μl/离心管,每20 μl全血中可提取40 μg的基因组DNA。

                       如需要去除RNA,可加入4 μl RNase A100 mg/ml,N9042)溶液,振荡混匀,室温放置5min。

                    加入20 μl蛋白酶K220 μl裂解液QS,65℃温浴10-15min,溶液应呈黑色,简短离心以去除管盖内壁的水珠,室温放置5min使溶液冷却。

                    加入220 μl无水乙醇,上下颠倒混匀,此时可能出现絮状沉淀,简短离心以去除管盖内壁的水珠。将溶液及絮状沉淀转移到纯化柱中,12,000 rpm离心1min,弃滤液。

                       若溶液体积大于纯化柱容积(700 μl),可分两次离心。

                    此时基因组DNA被吸附于DNA纯化柱中的硅胶膜上。

                    加入500 μl去蛋白液PS,12,000 rpm离心1min,弃滤液。

                      此步骤的作用是去除硅胶膜上吸附的蛋白、脂质等杂质,以获得高质量基因组DNA。

                    5  加入500 μl漂洗液PE,12,000 rpm离心1min,弃滤液。

                      漂洗液PE初次使用前用无水乙醇按1: 3稀释,即含75%乙醇。

                    加入500 μl漂洗液PE,12,000 rpm离心1min,弃滤液。

                    7  12,000 rpm离心3min,以彻底去除纯化柱中残留的液体。

                        此步骤的作用是去除残留乙醇,避免影响后续的酶促反应(PCR或酶切),同时利于基因组DNA充分溶解。

                    将纯化柱置于新的1.5 ml离心管中。向纯化柱中央处,悬空滴加30-100 μl洗脱液TE,室温放置2min。

                    9  12,000 rpm离心2min,管底即为高纯度基因组DNA,-20℃保存。

                       洗脱液TE可用去离子水代替,但其pH需为8.0-8.5。

                    对洗脱液TE 65℃预热,会提高基因组DNA的产量。


                    姓名
                    电话号码
                    电子邮箱
                    公司名称
                    地址
                    留言*
                     
                    验证码
                    提交
                    正规手机购彩 <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <文本链> <文本链> <文本链> <文本链> <文本链> <文本链>